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《蜂膠總黃酮的抗氧化及抗腫瘤活性研究》-遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
時(shí)間：2025-05-05來(lái)源：本站原創(chuàng)瀏覽：20


蜂膠是工蜂采集各種植物芽、葉中的樹脂等分泌物與其上顎腺、蠟腺等分泌物混合后形成的具有芳香氣味的黏性固體膠狀物。蜂膠作為傳統(tǒng)藥品和保健品使用歷史非常悠久。國(guó)內(nèi)外研究表明，蜂膠具有抗病毒、抗氧化、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等廣泛的生物活性，蜂膠中存在多類化學(xué)成分，其中包括黃酮類、酚酸類、萜烯類化合物等主要藥效成分。

姚靜等采用LC-IT-TOF-MS法進(jìn)行鑒別，發(fā)現(xiàn)中國(guó)蜂膠中含有高良姜素及酯類、槲皮素及酯類、短葉松素及酯類、白楊素等20余種黃酮類成分。
實(shí)驗(yàn)研究表明，從多種天然藥物中得到的總黃酮類提取物具有清除自由基、抗氧化、抗菌、抗病毒、保護(hù)心腦血管和抗腫瘤等作用，近年來(lái)，蜂膠總黃酮（TFP）的藥理作用研究也廣受關(guān)注，但對(duì)其抗氧化和抗癌作用的研究報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)室前期研究表明，TFP具有顯著的血管舒張作用，對(duì)全腦缺血-再灌注大鼠腦損傷具有明顯的保護(hù)作用。

目的：研究蜂膠總黃酮（TFP）的抗氧化活性及其對(duì)小鼠肝癌Hepa1-6細(xì)胞、人肺癌A549細(xì)胞和人胃癌SGC7901細(xì)胞增殖的抑制作用。

方法：通過(guò)測(cè)定TFP的總還原力及對(duì)1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除能力，評(píng)價(jià)TFP的體外抗氧化活性；采用CCK-8法檢測(cè)蜂膠總黃酮抗腫瘤細(xì)胞增殖的能力。
結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在25~150μg/mL濃度范圍內(nèi)TFP具有較強(qiáng)的總還原力，對(duì)DPPH自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除能力均呈現(xiàn)濃度依賴性增大，最大清除率分別為（72.47±3.13）%、（70.84±4.01）%和（68.24±4.56）%；50、100、200μg/mL的TFP對(duì)Hepa1-6、A549和SGC7901細(xì)胞的生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用，且在24~72h時(shí)間范圍內(nèi)的抑制作用隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增大。

結(jié)論：TFP在體外具有較強(qiáng)的抗氧化能力，且對(duì)Hepa1-6、A549和SGC7901細(xì)胞的生長(zhǎng)具有顯著的抑制作用。

心腦血管系統(tǒng)、腫瘤等多種疾病和人類的自然衰老都與氧自由基密切相關(guān)。黃酮類化合物的抗自由基作用已經(jīng)得到大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)，從天然藥物中篩選具有較強(qiáng)抗氧化活性的黃酮類化合物已成為新藥研究與開發(fā)重點(diǎn)關(guān)注的領(lǐng)域?？傔€原能力測(cè)定以及DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基等清除率測(cè)定是評(píng)價(jià)天然活性成分體外抗氧化活性的常用方法。DPPH是一種人工合成的比較穩(wěn)定的含氮自由基，其乙醇溶液在517nm處有特征吸收，外加抗氧劑可與DPPH結(jié)合，使其顏色和吸光度發(fā)生變化，可用于評(píng)價(jià)抗氧劑清除自由基的能力。通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的具有高反應(yīng)活性的羥基自由基可與水楊酸結(jié)合，生成在510nm處有強(qiáng)烈吸收峰的2，3-二羥基苯甲酸。

在體系中加入可清除部分羥基自由基的物質(zhì)可減少吸收峰的形成，用分光光度法測(cè)定體系的吸光度值可反應(yīng)自由基的含量，從而間接測(cè)定樣品的抗氧化能力。超氧陰離子是一類重要的活性氧自由基，可誘導(dǎo)大分子物質(zhì)產(chǎn)生氧化損傷，因此通過(guò)測(cè)定對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用可以評(píng)價(jià)物質(zhì)的抗氧化能力大小。本研究以蜂膠總黃酮為對(duì)象，通過(guò)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了蜂膠總黃酮的抗氧化能力。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蜂膠總黃酮具有較強(qiáng)的總還原能力，對(duì)DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基均具有較強(qiáng)的清除能力，并在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)濃度依賴性，其EC50值分別為71.01、73.63、84.85μg/mL，但總還原能力和自由基清除能力均弱于Vc。蜂膠總黃酮的抗氧化能力可能與其含有的高良姜素、短葉松素、白楊素等成分能調(diào)節(jié)體內(nèi)黃嘌呤氧化酶、過(guò)氧化物酶、環(huán)氧合酶-2、誘導(dǎo)性一氧化氮合酶等活性物質(zhì)有關(guān)。

腫瘤是臨床發(fā)病率和病死率均較高的疾病之一，目前臨床使用的多數(shù)抗癌化療藥物毒性均較大，因此，開發(fā)高效、低毒的天然抗腫瘤藥物已成為重要研究方向。近年來(lái)研究表明，多種天然藥物中提取出的黃酮類化合物具有明確的抗腫瘤活性，其作用機(jī)制可能涉及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、清除自由基、抑制腫瘤血管生成等多種途徑。本實(shí)驗(yàn)在研究蜂膠總黃酮抗氧化活性的基礎(chǔ)上，采用CCK-8法探討了蜂膠總黃酮對(duì)3種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制能力。

研究結(jié)果表明，蜂膠總黃酮對(duì)Hepa1-6、A549和SGC79013種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)均具有顯著的抑制作用，且在總黃酮濃度50~200μg/mL范圍內(nèi)、作用時(shí)間24~72h范圍內(nèi)呈現(xiàn)出明顯的濃度和時(shí)間依賴性，200μg/mL蜂膠總黃酮在作用72h后對(duì)Hepa1-6、A549和SGC7901細(xì)胞的抑制率分別達(dá)到了（78.62±2.49）%、（84.68±3.45）%和（88.31±3.81）%。

腫瘤的發(fā)病機(jī)制眾多，有研究發(fā)現(xiàn)氧自由基與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，較多的致癌物在體內(nèi)經(jīng)過(guò)代謝活化后形成自由基，在腫瘤發(fā)生過(guò)程中占有非常重要的角色，有效地控制自由基也是防止癌變的重要措施之一。因此，可以推測(cè)蜂膠總黃酮對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用也可能與其抗氧化活性有關(guān)。

綜上所述，蜂膠總黃酮具有較好的體外抗氧化活性，總還原能力較強(qiáng)，對(duì)DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基具有較高的清除能力，而且蜂膠總黃酮能抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，對(duì)Hepa1-6、A549和SGC7901細(xì)胞增殖抑制作用均較強(qiáng)。

（來(lái)源：蜂膠總黃酮抗氧化和抗腫瘤活性研究，遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,22(12)）作者王啟海1，左堅(jiān)2，梁楓1，裴文俊3，張夢(mèng)雨1（1.安徽中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，安徽?蕪湖?241002；2.皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院，安徽?蕪湖?241001；3.皖南醫(yī)學(xué)院安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽?蕪湖?241002）
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